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破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice

產(chǎn)品簡介

Boneslice骨切片是一種專門用于骨吸收實驗的檢測工具,通常由牛股骨的皮質部分制成,具有的尺寸和厚度,適合96孔板進行體外實驗。該骨切片主要用于監(jiān)測培養(yǎng)的破骨細胞的骨吸收情況,通過破骨細胞的骨吸收形成的吸收坑來評估其骨吸收能力。

產(chǎn)品型號:
更新時間:2024-07-11
廠商性質:代理商
訪問量:1325

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品牌其他品牌貨號250
規(guī)格50片供貨周期現(xiàn)貨
主要用途破骨細胞培養(yǎng)應用領域生物產(chǎn)業(yè)

破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice產(chǎn)品描述:

開始骨吸收實驗前用培養(yǎng)基重懸骨切片,成熟或早熟的破骨細胞,無論是由外周血單核細胞(PBMC)或共培養(yǎng)產(chǎn)生的,都可以將細胞分散覆蓋于骨切片上。根據(jù)破骨細胞的成熟形態(tài)和影響因素,凹點會在3-14天出現(xiàn)。破骨細胞數(shù)量可通過Tracp 活性實驗來觀察,吸收凹點和溝可通過甲苯藍染色觀察(如圖2.)。

破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice

來源:骨切片由牛股骨的皮質部分制成,*適合96孔板,直徑6mm。
厚度:1)0.2mm(適用于免疫熒光,共聚焦實驗)。
          2)0.4mm(適用于下游分析)
儲存:置于4°C下96%乙醇中。
應用:用于骨吸收實驗檢測,通過破骨細胞的骨吸收形成的吸收坑,可以用來監(jiān)測培養(yǎng)的破骨細胞的骨吸收情況,*適合96孔板。

 

骨吸收實驗簡介:

該方法提供一種易于檢測的定量方案,用于體外測定破骨細胞介導的骨吸收。破骨細胞接種于骨切片上,吸收坑的形成可以通過甲苯胺藍染色進行定量。

實驗材料和試劑:

1)  破骨細胞

2)  骨切片

3)  異丙醇

4)  甲苯胺藍(Sigma cat#198161)

5)  超純水

6)  96孔細胞培養(yǎng)板(Greiner , Cat#650185)

實驗設備:

1.       骨形態(tài)測量系統(tǒng)

2.       超聲波清洗器

操作流程:

1.       破骨細胞接種于(250000 細胞/孔)含和不含顱骨成骨細胞的96孔細胞培養(yǎng)板上(提前孔內放置骨切片)。

2.       細胞在合適的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)至少14天。

3.       此后,用PBS洗滌細胞兩次,在250ul 70%異丙醇中,用超聲波高功率處理至少15分鐘,使細胞從骨切片脫落。

注意:250ul 70%異丙醇處理使細胞更容易從骨切片脫落。

4.       加入100ul 甲苯胺藍溶液(1%溶解于水),室溫染色2分鐘。

5.       用250ul 超純水沖洗骨切片至少5次,以洗掉切片上的殘留物。

6.       吸收坑被染成深藍色(圖1),吸收坑面積可以通過骨測量系統(tǒng)進行量化或者吸收坑可通過光學顯微鏡觀察計數(shù)。

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