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破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice
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產(chǎn)品分類article
相關文章品牌 | 其他品牌 | 貨號 | 250 |
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規(guī)格 | 50片 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 破骨細胞培養(yǎng) | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice產(chǎn)品描述:
開始骨吸收實驗前用培養(yǎng)基重懸骨切片,成熟或早熟的破骨細胞,無論是由外周血單核細胞(PBMC)或共培養(yǎng)產(chǎn)生的,都可以將細胞分散覆蓋于骨切片上。根據(jù)破骨細胞的成熟形態(tài)和影響因素,凹點會在3-14天出現(xiàn)。破骨細胞數(shù)量可通過Tracp 活性實驗來觀察,吸收凹點和溝可通過甲苯藍染色觀察(如圖2.)。
來源:骨切片由牛股骨的皮質部分制成,*適合96孔板,直徑6mm。
厚度:1)0.2mm(適用于免疫熒光,共聚焦實驗)。
2)0.4mm(適用于下游分析)
儲存:置于4°C下96%乙醇中。
應用:用于骨吸收實驗檢測,通過破骨細胞的骨吸收形成的吸收坑,可以用來監(jiān)測培養(yǎng)的破骨細胞的骨吸收情況,*適合96孔板。
骨吸收實驗簡介:
該方法提供一種易于檢測的定量方案,用于體外測定破骨細胞介導的骨吸收。破骨細胞接種于骨切片上,吸收坑的形成可以通過甲苯胺藍染色進行定量。
實驗材料和試劑:
1) 破骨細胞
2) 骨切片
3) 異丙醇
4) 甲苯胺藍(Sigma cat#198161)
5) 超純水
6) 96孔細胞培養(yǎng)板(Greiner , Cat#650185)
實驗設備:
1. 骨形態(tài)測量系統(tǒng)
2. 超聲波清洗器
操作流程:
1. 破骨細胞接種于(250000 細胞/孔)含和不含顱骨成骨細胞的96孔細胞培養(yǎng)板上(提前孔內放置骨切片)。
2. 細胞在合適的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)至少14天。
3. 此后,用PBS洗滌細胞兩次,在250ul 70%異丙醇中,用超聲波高功率處理至少15分鐘,使細胞從骨切片脫落。
注意:250ul 70%異丙醇處理使細胞更容易從骨切片脫落。
4. 加入100ul 甲苯胺藍溶液(1%溶解于水),室溫染色2分鐘。
5. 用250ul 超純水沖洗骨切片至少5次,以洗掉切片上的殘留物。
6. 吸收坑被染成深藍色(圖1),吸收坑面積可以通過骨測量系統(tǒng)進行量化或者吸收坑可通過光學顯微鏡觀察計數(shù)。
破骨細胞骨吸收檢測骨切片 Bone Slice訂購:
品牌 | 英文名稱 | 中文名稱 | 規(guī)格 | 貨期 |
Bone slice | Bone Slices | 骨切片 | 50片 | 大量現(xiàn)貨 |